在培養(yǎng)基開發(fā)過程中，除去培養(yǎng)基中的支原體是至關重要的，以確保細胞培養(yǎng)的健康和實驗結果的準確性。以下是一些常用的方法來清除培養(yǎng)基中的支原體：

抗生素治療：

使用抗生素是清除支原體的一種有效方法。常用的抗生素包括泰樂菌素、林可霉素、壯觀霉素、喹諾酮和四環(huán)素等。

德國MB Zell Shield®細胞支原體祛除試劑是一種即用型的復合抗生素，可用于保護細胞培養(yǎng)體系免受支原體等污染物的干擾。

在使用抗生素時，需要根據支原體類型和藥物敏感性選擇合適的藥物，并按照藥物說明書進行操作。

熱處理：

將細胞培養(yǎng)基加熱至60℃以上可以有效地殺死支原體。然而，這種方法也會殺死細胞，因此只能在實驗結束后或不需要保持細胞活性的情況下使用。

過濾：

使用過濾器可以將細胞培養(yǎng)基中的支原體過濾掉。但這種方法可能無法清除支原體，且對于小分子的支原體可能效果不佳。

更換培養(yǎng)基：

一旦發(fā)現支原體污染，應立即更換新的細胞培養(yǎng)基，以避免支原體繁殖并擴散到整個培養(yǎng)體系中。

細胞株更換：

如果細胞株本身存在支原體污染，應立即更換新的、未受污染的細胞株。

純化清洗：

對于珍貴的細胞，可以通過純化清洗的方法去除支原體。這通常涉及使用PBS或培養(yǎng)基洗滌細胞數次，并通過離心力分離細胞和支原體。

預防措施：

在培養(yǎng)基開發(fā)和細胞培養(yǎng)過程中，采取預防措施是防止支原體污染的關鍵。這包括定期對實驗室環(huán)境進行消毒、對實驗操作人員進行培訓、以及定期對培養(yǎng)箱和其他實驗設備進行維護和檢查。

綜上所述，清除培養(yǎng)基中的支原體需要綜合使用多種方法，并根據具體情況選擇合適的方法。同時，預防措施的采取也是至關重要的，以減少支原體污染的風險。